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bao1618:3’utr报告hvbet系统构建
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hvbet表达水平主要取决于以下几个方面:

1.hvbet表达的启动:启动子是否被启动,表达;

2.RNA水平的修饰:RNA剪接;RNA的转运;RNA稳定性(比如miRNA或者LncRNA特定情况下对mRNA的调控);

3.蛋白水平的调节:翻译抑制,蛋白稳定性与酶解。

miRNA通过碱基互补配对的方式识别靶hvbet的3UTR区,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。因此,可以将目的hvbet的3UTR区域构建到含luciferase的报告hvbet上,通过比较miRNA过表达或inhibitor 与报告hvbet作用登录荧光值的变化,判断miRNA对靶hvbet的作用。再通过对3 UTR区进行定点突变的方法进一步确定miRNA与靶hvbet3UTR的作用位点。miRNA对靶hvbet功能的调控是当前hvbet的热点。通过鸿运荧光素酶报告hvbet登录hvbet寻找或验证miRNA对靶hvbet的调控作用是当前最常用的技术。

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