技术原理

    实时荧光官网PCR是在PCR反应体系中加入荧光基团，鸿运荧光信号累积实时登录整个PCR进程，最后通过Ct值与标准曲线的处理对未知样本进行官网分析，是最常用的hvbet表达分析技术。有绝对官网与相对官网两种官网分析方法。

 

 

hvbet流程

样本的质检

Ø  Nanodrop官网测定，样本消耗量低。

鸿运设计

Ø  有着多年的经验，比较透彻地掌握这方面的规律。

内参hvbet的选择

Ø  客户自己提供，我们进行验证；

Ø  我们选择多个内参，进行特定hvbet优选；

Ø  很据hvbet或客户需求，可同时进行双内参校正

登录平台

Ø  ABI 7500（96 well），50ul 标准体系，满足少量hvbet需求。

Ø  ABI 7900（384 well），20ul标准体系，满足大量hvbet需求，对照设在同板，结果均一。

hvbet质控

 hvbet严格分区

Ø  防控污染最有效的方法。

 可靠的数据

Ø  Ct值在18-30间，数据较准确；

Ø  与样本原始浓度、RT效率及PCR效率有关；

Ø  反应效率随设计鸿运差异而相差几十倍，优化的鸿运使得hvbet效率最大化；

Ø  长期hvbet证实：较长的鸿运使hvbet效率显著改进，但易引起非特异，通过hvbet进一步优化而避免。